3. Описание полиморфных белковых локусов у сиговых рыб.
В связи с относительно слабой изученностью генетического полиморфизма сиГовых рыб, в настоящей работе основное внимание уделено разработке методических основ генетического мониторинга у разных видов. Известно, что при проведении генетического мониторинга популяций рыб необходимо иметь генетическую интерпретацию выявленного у каждого вида полиморфизма исследованных белковых систем.
В связи с этим проведено подробное описание генетических систем каждого белка у сиговых рыб для того, чтобы они могли быть обоснованно использованы в качестве генетических маркеров специалистами (ихтиологами и генетиками), занимающимися проблемами охраны генофонда и восстановления рыбных запасов.
Ниже представлены генетические системы каждого белка у разных видов сиговых рыб, которые обнаруживаются при проведении электрофоретического анализа в полиакриламидном геле. Для описания генетической структуры подсчитывают количество гомо- и гетерозиготных особей по отдельным локусам с учетом особенностей генетической трактовки электро форетических белковых вариаций, выявленных на гелевых пластинах.
АСПАРТАTАминоТРАНСФЕРАЗА (AAT). По структуре белок аспартатаминотрансфераза относится к классу димеров и кодируется несколькими тканеспецифичными локусами. Окрашивание мышечной аспартатаминотрансферазы выявляет катодную и анодную зоны активности белка. В мышечной ткани активны митохондриальный, а также пара цитоплазматических локусов. С матических локусов.
На полученных гелях обнаруживается лишь анодная зона активности фермента, соответствующая паре дуплицированных локусов SAAT-1,2* (рис. 6.3).
Рис. 6.3. Схема электрофоретических спектров цитоплазматической аспартатаминотрансферазы.
Генотипы по локусам SAAT-1* u SAAT-2*, соответственно (обозначения над чертой): 1. а/а, а?а- все изученные виды сиговых рыбр. Coregonus; 2. a/b, ala- сиг, тугун, сибирская ряпушка, ряпушка (Печора); 3. а/с, а?а – арктический омуль; 4. с/с, а/а – арктический oмyль, валек; 5. с/с, с/с — нельма; 6. а/d, ala – сиг, пелядь, ряпушка (Печора); . Фенотипы SAAT-1,2 у типичной Европейской ряпушки (1-3) и нельмы (4,5) (обозначения под чертой): 1. alala/b; 2. ala/b/b; 3. a/b/bib; 4. alalalc; 5. alalcic.
Полиморфизм по этим локусам обнаружен у шести видов СиГовых рыб. Генотипическая изменчивость обусловлена взаимодействием четырех аллелей — *a, *b, *с. *d. Идентифицировано 8 фенотипов, два из которых проявляются в виде одной полосы (гомозиготы разных типов), а остальные шесть представляют комбинации из трех полос, различающихся по относительной подвижности и интенсивности окраски,
КРЕАТИНКИНАЗА (СК). Этот фермент, активный в мышечной ткани, является продуктом дуплицированной пары локусов, CK-A1,2*. Несмотря на димерную четвертичную структуру энзима, визуально различимые гетеродимеры не обнаруживаются ни между двумя локусами, ни между аллельными продуктами одного локуса. Наиболее часто встречаемый фенотип состоит из двух полос, быстрая из которых менее интенсивно окрашена и, предположительно, является продуктом посттрансляционной модификации отдельной полипептидной субъединицы (CK'). Медленно мигрирующая полоса соответствует первичным продуктам экспрессии преобладающих аллелей обоих локусов: аллеля *су арктического омуля, байкальского омуля иу байкальского сига, аллеля *а у всех других исследованных сиговых рыб (рис. 6.4).
Рис. 6.4. Электрофоретические спектры мышечной креатинкиназы Генотипы сиговых рыб по локусам CK-A1*u CK-A2*, соответственно: 1. а/а, ala – все изученные виды сиговых рыб, кроме омуля и сибирской ряпушки; 2. a/b, ala — типичная Европейская ряпушка, пелядь; 3. b/b, ala - пелядь; 4. с/с, с/с — арктический омуль, байкальский омуль, байкальский сиг; 5. а/с, с/с – арктический омуль. (Примечание: посттрансляционные субъединицы белка (ск) у некоторых видов суговых могут проявляться слабо, или не проявляться совсем)
Значительно сложнее изменчивость изолокусов CK-A1,2* обнаруживается в популяциях ряпушек. В отличие от типичной европейской ряпушки, для которой основным является фенотип 1, обусловленный экспрессией общего для обоих локусов аллеля *а (см. рис. 6.4; рис. 6.5), у сибирской ряпушки из Обского бассейна структурные дуплицированные гены дивергировали между собой и практически зафиксировались на аллелях *b и *d локусов CK-A2* и сK-A1*, соответственно. 
Рис. 6.5. Электрофоретические варианты локусов CK-A1,2* в популяциях ряпушек из разных регионов.
Во всех исследованных выборках из популяций С. sardinella из Обского бассейна помимо преобладающего аллеля *d по полиморфному локусу сK-A1* обнаружен также аллель *а, характерный для с. albula (см. рис. 6.5, фенотип 7).
Семь фенотипов ряпушки, обнаруженных в результате анализа сибирской ряпушки p. Колымы, р. Чаун и двух субпопуляций ряпушки печорского бассейна обусловлены экспрессией аллелей *a, *b и *d (см. рис. 6.5; фенотипы 1,2,4-8). Среди этих фенотипов можно наблюдать как варианты свойственные для типичных европейской и сибирской ряпушек (описание которых дано выше), так и ряд «промежуточных» спектров, которые могут быть интерпретированы только при условии полиморфизма по обоим структурным генам фермента. и.
Обращает на себя внимание, что по характеру распределения фенотипов креатинкиназы популяции ряпушки с обширной территории Евразии подразделяются на три группы: к группе «европейской ряпушки» (см. рис. 6.5, фенотипы 1,2) относятся популяции из Чудского, Ладожского, Онежского озер (Перелыгин, 1986а, б, 1987,1988,1989), водоемов бассейна Белого моря (Сендек, 2010), а также из р. Анадырь (Ермоленко, 1989а, в); фенотипами, свойственными для «сибирской ряпушки» (см. рис. 6.5, фенотипы 7,8) обладают выборки ряпушки из рек Оби (Перелыгин, 1986б, 1988) и Енисея (Ермоленко, 1989а, в); особый класс «гибридной ряпушки» составляют ряпушки из рек Чаун (Ермоленко, 1989а, в), Колыма и Печора (Sendek, 2002), у которых выявлены сложные наборы фенотипов, что позволяет предполагать аллопатрическое происхождения этих популяций.
Сопоставление двух исследованных субпопуляций печорской ряпушки по распределению фенотипов и аллелей мышечной креатинкиназы найболее наглядно демонстрирует произошедшее в этом регионе явление гибридицaзии в результате вторичного контакта приледниковых рас ряпушки, переживших последнее четвертичное оледенение в убежищах по обе стороны Урала. Так, для субпопуляции ряпушки с длинным миграционным нерестовым путем из предустьевых участков р. Печоры до ее притика – р. Усы (местное название этой формы ряпушки — «зельдь»), процентное соотношение фенотипов, характерных для европейской ряпушки (см. рис. 6.5, фенотипы 1 и 2) составляло 0,0%, в то время как у субпопуляции ряпушки с короткой нерестовой миграции до оз. Голодная Губа, располагающегося в предустьевом районе Печоры (местное название такой ряпушки — «саурей») этот же показатель составил 31,8%. Кроме того, частота аллеля *а, свойственного европейской ряпушке, оказалась равной 0,164 у «зельди» и 0,346 у «саурея». Эти данные указывают на наблюдаемые в современные субпопуляциях ряпушек, различающиеся по своей экологии, последствия дифференцированной интрoгрессии генов, которыми характеризовались ряпушки из разобщенных приледниковых убежищ.
ГЛИЦЕРОЛ-3-ФОСФАТДЕГИДРОГЕНАЗА (G3PDH). Данный энзим кодируется тремя локусами, причем в мышечной ткани активны локусы GЗР. DH-1* и GЗPDH-2*, и слабо проявляется локус GЗPDH-3*, а в печени выявляются продукты экспрессии GSPDH-1* и GЗPDH-3*, а локус GЗPDH-2* не проявляет активности (рис. 6,6,6.7). Субъединицы, кодируемые всеми тремя локусами, свободно ассоциируются в гетеродимерные молекулы. Обнаружено семь аллелей по локусу G3PDH-1*, пять аллелей по локусу GЗРpH-2* и пять аллелей по локусу GЗPDH-3*.
Рис. 6.6. Электрофоретические спектры локусов GЗPDH-1* и GЗPDH-2* Генотипы сиговых рыб по локусам GЗРОН-1* u GЗРОН-2“, соответственно: 1. ala, ala – ряпушка, пелядь, тугун, сиг, чир, муксун, байкальский омуль, байкальский сиг; 2. а/d, ala – ряпушка, пелядь, тугун, сиг, арктический омуль, муксун, байкальский омуль, байкальский сиг; 3. а/с, а/а - ряпушка, сиг, тугун, арктический омуль; 4. a/b, ala - пелядь; 5. d/d, ala – тугун, арктический омуль, нельма; 6. с/d, ala- тугун, арктический омуль; 7. с/с, аlа – арктический омуль; 8. b/с, а/а – арктический омуль; 9. b/d, ala - арктический омуль; 10. bib, ala- арктический омуль; 11. а/а, але – ряпушка, тугун, сиг, муксун, байкальский омуль, байкальский сиг; 12. а/а, ele - ряпушка (Ладога), тугун, сиг; 13. ala, ald – ряпушка, сиг; 14. g/g, g/g/ - валек; 15. ala, dvd – ряпушка; 16. а/а, dle – ряпушка; 17. d/d, ele – тугун; 18. а/d, ele – тугун; 19. а/d, але — тугун; 20. d/d, ale – тугун, муксун; 21. с/d, ale – тугун; 22. а/f, ale – тугун; 23. d/f, ala – тугун; 24. с/f, ala – тугун; 25. а/с, але – тугун; 26. а/а, а/с – пелядь; 27. а/а, с/с – пелядь; 28. а/i, alaбайкальский омуль
Рис. 6.7. Схема электрофоретических спектров локуса GЗPDH-3*
Генотипы сиговых рыб по локусу GЗPDH-3*: 1. а/а – ряпушка, тугун, арктический oмyль, сиг, чир, нельма, муксун, байкальский омуль, байкальский сиг, валек. 2. а/е – сиг, муксун; 3. ele - cиг, муксун; 4. с/с — пелядь; 5. а/с – ряпушка; 6. f/f— муксун; 7. elf — муксун; 8. а/f — муксун; 9. a/b – байкальский омуль
глюкозо-6-ФОСФАТИЗОМЕРАЗА (GPI). Сиговые рыбы обладают четырьмя локусами по этому энзиму. Медленно мигрирующая зона прокраСки проявляется в образцах, приготовленных из мышечной ткани. Эта Зона кодируется у сиговых рыб дуплицированными локусами GP-B1,2* (рис. 6.8).
Рис. 6.8. Электрофоретические спектры глюкозо-6-фосфатизомеразы из мышечной ткани.
Генотипы по локусу GP-A2*, локусы GPI-B1,2* мономорфны: 1. а/а – все исследованные виды сиговых рыб, кроме валька; 2 a/b – сиг, ряпушка, муксун; 3. b/b – сиг; 4. а/с – тугун, нельма, муксун; 5. с/с – тугун, нельма; 6. ele – валек; Генотипы по локусам GP-B1* и GP-B2*, соответветственно, локус GPI-A2* мономорфен: 7. a/b, ala – тугун, ряпушка; 8. а/е, а/а – тугун; 9. ele, ala – тугун; Фенотипы GPI-B1,2 чира, GPI-A2* мономорфен: 10. а/а/а/f; 11. а/а/f/f; 12. affffff. Генотипы по локусу GPI-A1*: 1. а/а- ряпушка, пелядь; 2. а/ь – ряпушка, муксун; 3. b/b – арктический омуль, сиг, чир, нельма, байкальский омуль, байкальский сиг, муксун; 4. а/с — ряпушка, пелядь; 5. с/с – ряпушка, пелядь; 6. b/с – пелядь; 7. с/е – пелядь; 8. ele – валек; 9. b/d – сиг; 10. fff — тугун.
При окраске образцов мышц, помимо дуплицированных локусов GPiВ1,2*, проявляется еще и более быстрая зона активности белка, вызванная экспрессией локуса GP-A2*. Между локусами GPI-B1,2* и GP-A2* образуются характерные гетеродимеры (рис. 6.8). На гелевых пластинках, полученных в результате электрофореза образцов из препаратов печени, проявляется еще один, четвертый локус фермента, GP-A1*. Продукты этого локуса имеют промежуточную подвижность по сравнению с локусами GP-B1,2* и GP-A2*; между локусами GPI-A1* и GPI-A2* (который также экспрессируется в тканях печени) образуются легко обнаруживаемые гибридные димерные молекулы. Изменчивость в локусе GP-A1*у изученных популяций сиговых вызвана экспрессией большого числа аллельных вариантов: *a, *b, *с. *d*, *е, *f (рис. 6.9).
Рис. 6.9. Электрофоретические варианты глюкозо-6-фосфатизомеразы из ткани печени
Рис. 6.10. Схема электрофоретических спектров идитoлдегидрогеназы
у сиговых рыб не Генотипы по локусам sIDDH-1* u sIDDH-2*, соответственно (обозначения над чертой): 1. а/а, с/с – все исследованные виды сиговых кроме европейской и сибирской ряпушек, нельмы и валька; 2. а/а, а/с – сиг, пелядь, муксун, арктический омуль; 3. ala, ala - сиг, европейская и сибирская ряпушки, нельма, муксун; 4. а/с, с/с – пелядь, тугун, арктический омуль, байкальский омуль; 5. с/с, с/с – европейская и сибирская ряпушки, нельма, байкальский омуль, валек; 6. ala, alf – сиг; 7. а/а, f/f – сиг; 8. а/а, с/f — сиг; 9. а/с, c/f – сиг; 10. а/с, fff – сиг; 11. с/с, f/f – сиг; 12. а/а, dvd – чир, байкальский омуль; 13. а/а, сld – сиг, чир, байкальский омуль, байкальский сиг; 14. а/а, а/g – сиг; 15. а/а, с/е – сиг; 16. ale, с/с – арктический омуль;
Фенотипы европейской и сибирской ряпушек (1-15) и нельмы (1-3) по ѕIDDH-1,2 (обозначения под чертой): 1. а/а/с/с; 2. alala/с; 3. а/c/c/с; 4. с/c/c/d; 5. с/c/d/d; 6. с/d/d/d; 7. а/а/d/d; 8. alalald; 9. а/d/d/d; 10. а/а/c/d; 11. а/c/c/d; 12. а/c/d/d; 13. а/clcle; 14. а/а/се; 15. с/c/cle.
L-ИдитолДЕГИДРОГЕНАЗА (СОРБИтоЛДЕГИДРОГЕНАЗА) (IDDH). Данный белок кодируется дуплицированной парой локусов, активных в печени. Установлено, что для большинства видов основные аллели каждого из двух локусов тетрамерного фермента имеют различные Подвижности: *a (*100) в локусе ѕIDDH-1* и *c (*180) в локусе ѕIDDH-2*, Белок считается одним из наиболее информативных для популяционногенетических исследований сиговых рыб. Значительная вариабельность большинства видов объясняется присутствием в их генотипах помимо аллелей *аи *с также вариантов *d, *е, *f, *g. Наиболее сложный характер вариабельности по этому белку наблюдается в популяциях ЕвропейСкой и Сибирской ряпушек (рис. 6.10).
Рис. 6.11. Электрофоретические варианты цитоплазматической изоцитратдегидрогеназы
Генотипы (1-7) по локусу ѕIDHP-4*, локус stDHP-3* мономорфен: 1. а/а - все исследованные виды сиговых рыб, кроме арктического омуля и валька; 2. с/с – нельма; 3. а/с – нельма; 4. d/d – арктический омуль; 5. ald – сиг; 6. a/b – ряпушка, сиг, чир, муксун, байкальский омуль; 7. а/f - ряпушка, сиг; Генотип (8) валька по локусам slDHP-3*u s/DHP-4*: d/d, ala.
изоциТРАТДЕГИДРОГЕНАЗА (IDHP). Этот димерный фермент имеет две зоны активности. Митохондриальная форма белка – mlDHP, преобладает в мышцах, а цитоплазматическая форма slDHP активна в печени. обе формы кодируются дуплицированными парами локусов: mIDHP-1,2* и s/DHP-3,4*, соответственно.
Исследована цитоплазматическая форма энзима – sIDHP. Основной фенотип у большинства сиговых рыб представлен тремя полосами в результате экспрессии аллелей с различными подвижностями, выступающих в качестве основных в каждом локусе (рис. 6.11). Медленно мигрирующая фракция является продуктом локуса slDHP-3* с единственным аллелем *а для всех видов сиговых, кроме валька, фиксированного по данному локусу по аллелю *d.
ЛАКТАТДЕГИДРОГЕНАЗА (LDH). Изоферменты лактатдегидрогеназы у Сиговых рыб кодируются пятью генами, причем четыре из них, возникшие в результате дупликации исходных локусов LDH-A* и LDH-B*, активны в мышечной ткани. Локус LDH-C* действует в ретине глаза, а одна из пары дуплицированных локусов, LDH-B1* и LDH-B2* — в тканях печени. Данный фермент является тетрамером, поэтому спектр белка на электрофореграммах в типичном случае состоит не менее чем из 15 полос, различающихся по степени прокраски фракций. Локус LDH – В1* оказался инвариантным у всех исследованных видов сиговых рыб, ав остальных трех локусах было обнаружено по четыре аллеля (рис. 6.12).
Рис. 6.12. Схема электрофоретических спектров лактатдегидрогеназы. Генотипы по локусу LDH-A1*, локусы LDH-A2*, LDH-B1*, LDH-B2* – мономорфны: . 1. а/а – все исследованные виды сиговых рыб, кроме валька; 2. а/ф — пелядь, тугун, сиг; 3. bb – тугун; 4. а/с – сиг; 5. f/f – валек; Генотипы по локусам LDH-A1*u LDH-A2*, локусы LDH-B1* u LDH-B2* — мономорфны: 6. а/а, але — тугун; 7. a/b, ale — тугун; Генотипы по локусу LDH-A2*, локусы LDH-A1*, LDH-B1*, LDH-B2* – мономорфны: 8. a/b – сибирская ряпушка; 9. bb – сибирская ряпушка; 10. а/с — сибирская ряпушка; Генотипы по локусу LDH-B2*, локусы LDH-A1*, LDH-A2*, LDH-B1* – мономорфны: 11. ald — тугун; 12. а/е – европейская ряпушка; 13. bb — нельма.
МАЛАТДЕГИДРОГЕНАЗА (MDH). Имеются две цитоплазматические формы этого энзима: медленно мигрирующая в электрическом поле, обозначаемая ѕMDH-A*, активна в печени; более близкая каноду зона прокрашивания обусловлена действием мышечной формы фермента, ѕMDH-B*. Обе зоны активности представляют собой продукты экспрессии дуплицированных пар локусов, ѕMDH-A1,2* и ѕМон-В1,2*, соответственно.
В исследованных популяциях сиговых рыб обнаружено пять аллелей печеночных локусов sMDH-A1,2*: *a, *b, *с. *d, *f. Основной фенотип всех Сиговых рыб представлен в виде единственной полосы, обнаруживающей гомозиготное состояние двух локусов sMDH-A1* и SMDH-A2* по изоаллеляма (рис. б.13). -
Рис. 6.13. Электрофоретические спектры цитоплазматической малатдегидрогеназы из печеночной ткани
Генотипы по локусу ѕMDH-A1*, локус sMDH-A2* мономорфен (обозначения над чертой): 1. а/а- все исследованные виды сиговых рыб; 2. a/b— сиг; 3. bb – сиг; 4. а/d-европейская и сибирская ряпушки; 5. g/g – сиг (Ладога); Фенотипы тугуна по ѕMDH-A1,2:1. alalalb; 2. ala/b/b; 3. alalaff; 4. а/а/fff; 5. ala/b/f; 6. albffff; 7. a/b/blf.
У исследованных сиговых выявлен также полиморфизм цитоплазматической формы белка, активной в мышечной ткани (локусы SMDH-B1,2*). Из пары дуплицированных локусов только локус sMDH-B1* полиморфен в популяциях исследованных сиговых рыб (рис. 6.14).
Рис. 6.14. Электрофоретические варианты цитоплазматической малатдегидрогеназы из мышечной ткани он Генотипы по локусу ѕMDH-B1*, локус sMDH-B2* мономорфен: 1. а/а – все исследованные виды сиговых рыб; 2. a/b-пелядь, тугун, сиг; 3. b/b-байкальский сиг, байкальский омуль; 4. а/с — пелядь, тугун, сиг; 5. а/d - арктический омуль; 6. d/d – арктический омуль; 7. а/е – европейская ряпушка.
NADP-ЗАВИСИмый МАЛИК-ЭНЗИМ (МЕР). Этот тетрамерный фермент обнаруживает на электрофореграммах две анодные зоны активности. Более медленная зона представляет митохондриальную форму белка и более четко проявляется в мышечной ткани. Быстро мигрирующая цитоплазматическая форма преобладает в тканях печени, но в мышечных образцах также слабо прокрашивается. Обе супернатантные формы энзима Кодируются дуплицированными парами локусов, тМЕР-1,2* и ѕМЕР-3,4*.
У большинства сиговых рыб митохондриальная форма фермента представлена в виде одной полосы – продуктов экспрессии аллелей обоих локусов с идентичной подвижностью (рис. 6.15).
Рис. 6.15. Схема электрофоретических спектров NADP+ – зависимой митохондриальной малатдегидрогеназы
Генотипы по локусам тМЕР-1,2*: 1. alalala – все исследованные виды сиговых рыб, кроме тугуна и валька; 2. fffffff — тугун; 3. g/g/g/g – валек; Генотипы по локусу тМЕР-1*, локус тМЕР-1* мономорфен: 4. а/с – омуль, чир; 5. с/с – омуль, чир
В популяциях сиговых рыб широко распространен полиморфизм цитоплазматической формы фермента – локусов sMEP-3,4* (рис. 6.16).
Рис. 6.16. Электрофоретические варианты NADP+ — зависимой цитоплазматической малатдегидрогеназы у сиговых рыб.
Генотипы по локусам ѕМЕР-3* u ѕМЕР-4*, соответственно (обозначения над чертой): 1. а/а, а?а – европейская и сибирская ряпушки, пелядь, арктический омуль, чир, тугун, нельма; 2. ala, a/b – европейская и сибирская ряпушки, арктический муль, байкальский омуль; 3. ala, b/b – европейская и сибирская ряпушки, арктический омуль, сиг, муксун, байкальский омуль, байкальский сиг; 4. а/с, bb – сиг, арктический омуль, муксун; 5. с/с, bb – сиг, арктический омуль, муксун; 6. a/b, bb – сиг; 7. а/а, dd – европейская и сибирская ряпушки; 8. ala, ald - европейская и сибирская ряпушки; 9. а/а, bd - европейская и сибирская ряпушки; Фенотипы пеляди (1-11), тугуна (12-17) и валька (18) по ѕМЕР-3,4* (обозначения под чертой): 1. alalalb; 2. alalbib; 3. a/b/b/b; 4. а/d/d/d; 5. ala/did; 6. alalald; 7. b/b/d/d; 8. b/d/d/d; 9. a/b/d/d; 10. ala/b/d; 11. a/b/b/d; 12. eleffff; 13. alalele; 14. alalale; 15. alelelf; 16. alale/f; 17. ale/fff; 18. glg/g/g.
ФосфоглюкоНАТДЕГИДРОГЕНАЗА (PGHD).
Данный фермент относится к числу низкополиморфных, имеет димерную структуру и кодируеется одним локусом. У исследованных сиговых рыб полиморфизм в локусе PGDH* обнаружен в популяциях арктического и байкальского омулей (рис. 6.17).
Рис. 6.17. Электрофоретические варианты фосфоглюконатдегидрогеназы Генотипы по локусу PGDH*: 1. а/а – все исследованные виды сиговых рыб, кроме байкальского омуля и байкальского сига; 2. b/b— тугун; 3. a/b - гибрид тугуна и пеляди; 4. а/g – арктический омуль; 5. ald - арктический омуль; 6. ale – байкальский омуль; 7. ele – байкальский омуль; 8. elg – байкальский омуль; 9. elf – байкальский омуль.
ФОСФОглюкоМУТАЗА (PGM). Оба локуса этого мономерного белка, PGM-3* и PGM-4*, активны в тканях печени, в мышцах проявляет активность только локус PGM-3*. В локусе PGM-3* найдено два аллеля, *а (*100) и *b (*50); в локусе PGM-4* обнаружено три аллеля, *a (*100), *b (*150) и *c (*50). Наиболее частый фенотип, встречаемый или популяциях сиговых рыб, состоит из двух полос, реже обнаруживаются комбинации из трех или четырех полос (рис. 6.18).
Рис. 6.18. Электрофоретические спектры локусов PGM-3* и PGM-4* фосфоглюкомутазы.
Генотипы по локусам PGM-3*uPGM-4*, соответственно: 1.ala, ala- все исследованные виды сиговых рыб, кроме байкальского омуля и байкальского сига; 2. a/b, ala-cиг, муксун, европейская и сибирская ряпушки; 3. bb, ala – сиг, муксун, европейская и сибирская ряпушки; 4. а/а, a/b – европейская и сибирская ряпушки, тугун, арктический омуль; 5. a/b, a/b - европейская и сибирская ряпушки; 6. b/b, ala- байкальский омуль; 7. bb, а/с - байкальский омуль, байкальский сиг; 8. bb, с/с – байкальский омуль, байкальский сиг.
Обнаружен полиморфизм по цитоплазматической форме белка ѕSOD*. Выявлено несколько гетерозигот a/b, которые проявляются в виде трехполосных фенотипов, характерных для димерного белка. При этом частота аллеля *а невелика (рис. 6.19).
В популяциях сиговых рыб также исследована митохондриальная форма супероксиддисмутазы – msoD*, которая в отличие от цитоплазматической, является тетрамерной (рис. 6.20). Зона экспрессии msoD* на гелевых пластинках, по сравнению с цитоплазматическими фракциями, располагается ближе к старту. Как цитоплазматическая, так и митохондриальная формы белка активнее прокрашиваются на препаратах, приготовленных из тканей печени.
Рис. 6.19. Электрофоретические варианты цитоплазматической супероксиддисмутазы Генотипы по локусу ѕSOD*: 1. а/а - ряпушка, пелядь; 2. а/ь – ряпушка, пелядь, омуль; 3. b/b – все исследованные виды сиговых рыб, за исключением валька; 4. bc – омуль; 5. ее – валек
Рис. 6.20. Варианты электрофоретических спектров митохондриальной сети супероксиддисмутазы. Генотипы по локусу msoD*: 1. а/а – все исследованные виды сиговых рыб; 2. Б/b – чир; 3. a/b – чир; 4. а/с — омуль.
Этот димерный мышечный белок кодируется у сиговых рыб одним локусом ESTD*. Полиморфизм некоторых видов сигов объясняется экспрессией двух альтернативных аллелей, причем частота редкого аллеля *b с подвижностью *120 невелика. По альтернативному аллелю *сс подвижностью *80 фиксирован по этому локусу валек (рис. 6.21).
Рис. 6.21. Электрофоретические спектры эстеразы-D у сиговых рыб. Генотипы по локусу ESTD*: 1. а/а – все исследованные виды сиговых рыб, кроме валька; 2. b/b – европейская и сибирская ряпушки; 3. a/b – европейская и сибирская ряпушки, сиг; 4. с/с — валек.